Recuento de Leucocitos

 

 

Instroducción

Es la cuantificación de glóbulos blancos existentes en 1 mm3  a partir de un conteo en la cámara de Neubauer


Fundamento

La sangre se diluye en diluyente Türk para posteriormente ser colocado en una cámara de Neubauer, ahi se contarán las células presentes en los 4 cuadrantes grandes de los extremos

El líquido de Türk es una sustancia ácida que se compone de una solución hipotónica como colorante y acido acético, esto favorece a la coloración de leucocitos y el ácido ayuda a eliminar células no deseadas como los eritrocitos

Muestra

Sangre anticoagulada con EDTA

Material

  • Pipeta de Thoma blanca
  • Tubo de goma con boquilla
  • Cámara de recuento Neubauer
  • Cubreobjetos especial
  • Microscopio

Reactivo

Liquido de Hayem    Sulfato Sódico
Cloruro Sódico
Cloruro Mercúrico     
Agua destilada		2.5 g
0.5 g
0.25 g
100 ml       


Tambien se puede utilizar solución isotónica

Procedimiento
  1. Posicionar el cubreobjetos en la cámara de Neubauer
  2. Colocar el tubo de goma en la entrada superior de la pipeta de Thoma
  3. Aspirar de un tubo sangre llenando la pipeta hasta 0.5 (si sobrepasa esta graduación tomar un pedazo de papel o algodón y colocando en la puta para que absorba el sobrado
  4. Limpiar la pipeta por fuera con un papel
  5. Aspirar diluyente de Türk hasta llegar a la graduación 11
  6. Quitar el tubo de goma y tapar los extremos con papel parafilm
  7. Poner en el agitador por 60 segundos
  8. Una vez hecho retirar el papel y desechar las primeras 3 o 4 gotas emitidas por la pipeta
  9. Depositar la siguiente gota entre el cubreobjetos y la cámara dejando que esta se absorba y distribuya por capilaridad. 
    La pipeta debe estar colocada en posición casi vertical
  10. Colocar la cámara de Neubauer en el microscopio
  11. Contar los leucocitos de los 4 cuadrantes que estan coloreados de color azul en la imagen


Es importante que para evitar confusiones, por ello, se hace el conteo solo dentro de la zona del cuadrado y en cuanto a los hematíes que se encuentran en las líneas solo se consideran los que están el borde superior y derecho
Forma correcta de contar los leucocitos, contando solo las
células del  interior y del borde superior e izquierdo (lineas
verdes) de un cuadrado pequeño. En este ejemplo los
 de color rojo son los que se toman en cuenta


Los cuadrados pequeños se deben observar en zic zac


Cálculos
Una vez contados los 5 cuadrados medianos de la cámaras se debe realizar el siguiente calculo:
  1. Sumamos los leucocitos de los 4 cuadros grandes
  2. El resultado de la suma se multiplica por el factor de dilución (puede ser 10 o 20) y también por la inversa de la altura
  3. Por último se divide entre el área del los 4 cuadrados (4mm)
  4. El objetivo de tenerlo a la inversa a la altura  es que indirectamente se multiplique con el área (Geometría: altura x área = mm3)

Valores de Referencia
4,000 - 11,000 G.B./mm3 

Interferencias

  • Infecciones
  • Embarazo
  • Hemorragia
  • Medicamentos