Cuantificación de Trombina y Tromboplastina


La hemostasia es el proceso que realizan el cuerpo cuando un vaso sanguíneo ha sido dañado, ante esto  los vasos, proteínas y los cuerpos sanguíneos reaccionaran y realizaran una serie de procesos fisiológicos y bioquímicos que contribuyan a la perdida de sangre y la recuperación y sanación del vaso.

Tiempo de Protrombina (TP)


Fundamento

A este método se le conoce como Howell-Quick, este consiste en tomar el tiempo en que tarda en coagular una muestra con citrato sódico cuando esta se expone a una suspensión de tromboplastina.

Esta prueba evalúa el funcionamiento de la vía extrínseca (Factor VII) y común (Factor X,V, II y I)

Material

  • Pipeta
  • Cronómetro
  • Tubo de ensaye
  • Tubo de extracción al vacío con citrato de sodio (tapón azul)

Reactivos

  • Tromboplastina cálcica

Procedimiento

  1. Tomar una muestra de sangre con el tubo con citrato de sodio
  2. Centrifugar el tubo a una velocidad de entre 1,500 a 2,000 rpm por 10 minutos
  3. Remover el plasma separado a un tubo de ensaye
  4. Precalentar por 3 minutos el plasma y los reactivos en baño María
  5. En otro tubo colocar 200μL de la tromboplastina tisular ya precalentada
  6. Agregar 100μL de plasma citratado
  7. Homogenizar y poner en marcha el cronómetro mientras lo ponemos en el baño maría
  8. Después de 8 segundos sacar el tubo y revisar que se forme un coagulo
  9. Cuando se forme parar el cronómetro
Es necesario realizar la misma prueba con un plasma testigo normal. Una vez hecho realizar el INR

Cálculos

Valores de referencia

Tiempo: 12-13 segundos

Actividad Porcentual: 71-100%

INR: 2.0-3.0


Tiempo de Tromboplastina (TTPA)

Fundamento

A este método se le conoce como Howell-Quick, este consiste en tomar el tiempo en que tarda en coagular una muestra con citrato sódico cuando esta se expone a una suspensión de tromboplastina.

Con esta prueba se busca evaluar la respuesta de la vía intrínseca (Factor XII, XI, IX, VIII) y la via común (Factor X, V, II, I)

Material

  • Centrifugadora
  • Tubos de ensaye
  • Baño maría
  • Tubo con citrato de sodio
  • Pipeta

Reactivos

  • Cloruro de Calcio
  • Cefalina kaolín comercial

Procedimiento

  1. Tomar una muestra de sangre en un tubo de citrato de sodio
  2. Centrifugar por entre 1500 a 200 rpm durante 10 minutos
  3. Retirar el plasma centrifugado en otro tubo
  4. Hidratar
  5. Precalentar por 3 minutos los reactivos y el plasma en baño maría 
  6. En otro tubo agregar 200μL de tromboplastina o 100μL de tromboplastina y 100μL cloruro de calcio
  7. Colocar 100μL del plasma citratado
  8. Homogenizar y colocar el tubo en el baño María mientras ponemos en marcha el cronómetro
  9. Después de 30 segundos sacar el tubo
  10. Parar el cronómetro una vez que se observe la formación de un coagulo

Valores de Referencia

30-50 segundos