La tinción hematoxilina eosina o H-E es una técnica del tipo ácido base, la cual consiste en que sobre un tejido se aplica Hematoxilina la cual teñirá de morado a toda estructura que sea de carga negativa (como los nucleos), para posteriormente añadir un tinte que sirva de contraste como la Eosina que teñirá de rosa toda estructura de carga positiva como es el citoplasma de las células
Materiales
- Cajas Petri
- Goteros
- Cajas Coplin
Reactivos
- Xilol
- Alcohol Absoluto-Xilol
- Alcohol Absoluto
- Alcohol del 96°
- Alcohol del 70°
- Hematoxilina de Harris
- Eosina
- Hidróxido de amonio
- Agua destilada
- Alcohol ácido
Preparación de hidróxido de amonio
- En una caja Petri poner agua destilada hasta la mitad
- Posteriormente agregar 9 gotas de hidróxido de amonio
Procedimiento
- Poner la muestra ubicada en un portaobjeto s en un frasco con xilol por 5 minutos
- Tras esos 5 minutos retirar y poner el portaobjetos en alcohol absoluto con xilol por 5 minutos
- Pasar y lavar en alcohol absoluto por 5 minutos
- Lavar en alcohol de 96° por otros 5 minutos
- Lavar con alcohol de 70° por 5 minutos
- Hidratar con agua destilada durante por 5 minutos
- Secar la preparación
- Teñir con hematoxilina de Harris, dejando reposar con la hematoxilina por 3 a 5 minutos
- Virar en agua destilada hasta que se aprecie un color azul-morado
- Pasar a alcohol ácido hasta notar un cambio de coloración
- Volver a lavar en agua
- Diferenciar sumergiendo durante unos segundos en agua amoniacal (hidróxido de amonio)
- Lavar en agua
- Volver a secar la preparación
- Teñir con eosina reposando por 30 segundos
- Inclinar la muestra y con un gotero dejar gotear sobre este, alcohol del 96°, 2 veces
- De igual manera gotear sobre la muestra alcohol absoluto por otras 2 veces o lavados
- Lavar 2 veces con alcohol absoluto- xilol haciendo un lavado cada 1 minutos
- Dejar en xilol por 5 a 10 minutos
- Colocar el cubreobjetos
