Introducción
El frotis es un método de visualización al microscopio que consiste en la extensión de una gota de sangre arterial a largo de un portaobjetos desde un extremo, logrando que las células se dispersen formando una sola capa de estas. Tiene el propósito de poder visualizar la morfología y estado de los elementos de la sangre, generalmente se usa para eritrocitos
Partes de un frotis
Un frotis se constituye de una cabeza, un cuerpo y una cola.
Cabeza
- Parte inicial del frotis (donde yacía la gota de sangre inicialmente)
- Lugar con mayor concentración de linfocitos y los eritrocitos tienden a estar aglomerados
- Parte mas gruesa
Cuerpo
- Se le conoce como "zona ideal" pues es el lugar donde se pueden apreciar mejor las células
- Adecuada proporción de leucocitos
Cola
- Hay mayor proporción de leucocitos grandes como granulocitos y monocitos
- Hematíes con tonalidad uniforme además de deformados
- Abundancia de plaquetas
Parámetros del estudio
- Morfología
- Concentración de hemoglobina
- Distribución de los eritrocitos
- Artificios de los eritrocitos
Importancia Clínica
Muchas enfermedades de los glóbulos rojos no es posible detectarlas por medio de estudios como determinación de hemoglobina, hematocrito o el recuento de glóbulos, no obstante, una extensión de sangre y/o de medula ósea es capaz de detectarlas
Patologías que se pueden detectar
- Esferocitosis
- Eliptocitosis
- Estomacitosis
Fundamento
Las extensiones se realizan deslizando un porta sobre otro en el que se encuentra una gota de sangre previamente agregada en uno de los costados. Asi se obtiene una fina capa de células sanguíneas que constituyen la cabeza, cuerpo y cola del frotis.
Entre mas cerca de la cola se esté, mayor dispersión de células habrá y por ende también menor cantidad de estas.
Asi, se puede observar perfectamente las células al microscopio cuando se observe a inmersión
Material
- Cubreobjetos
- Pipeta pasteur
- Bulbos
- Lanceta
Muestra
Sangre total anticoagulada (EDTA)
Procedimiento
- Tomar un portaobjetos (portaobjetos base) y con una lanceta con alcohol lavar y secar con papel filtro
- Colocar una gota de sangre de 2-3 mm de diámetro (5 μL) a 2 cm del borde del portaobjetos
- Colocar un segundo portaobjetos en un ángulo de 30-45° sobre el portaobjetos base en el extremo contrario al de la gota, la parte superior del extensor debe estar arriba de la gota de sangre, no al otro lado
- Desplazar lentamente el porta hasta llegar a la gota
- Dejar que la gota se extienda por todo el borde del portaobjetos extensor por capilaridad sin levantarlo del primer portaobjetos
- Deslizar el portaobjetos extensor hacia adelante de manera firme y segura a una velocidad media hasta 1 cm antes de llegar al otro extremo del portaobjetos base
- Una vez realizado lo anterior, poner a secar (puede ser agitando al aire). NO SOPLAR CON LA BOCA
- Rotular
Recomendaciones
Tener un portaobjetos elegido exclusivamente para el uso de extensión
Condiciones de una buena extensión
- Tener cabeza, cuerpo y cola bien definidos
- La cabeza cerca de uno de los extremos del porta
- Cola del frotis cerca del extremo contrario
- Tener barba, se refiere que la cola debe estar deshilachado
- Extensión fina y homogénea
Defectos de una extensión
Un frotis sanguineo requiere de una tecnica precisa pues un mal manejo de la técnica puede dar un frotis que no es de utilidad para la visualización de las celulas
- Corta y gruesa: ocurre cuando se deposita una gota con menor cantidad a la debida por lo que no se alcanza a formar las 3 partes del frotis
- Con estrías transversales: Es de los errores mas comunes entre primerizos, se debe a que el extendido no se hace uniformemente haciendo pequeñas e imperceptibles pausas o se hace mayor presión sobre el portaobjetos base, incluso si la técnica se hace demasiado lenta
- Extendido demasiado rápido: Cuando se hace un extendido demasiado rápido no se aprovecha la gota adecuadamente
- Se de be a un depósito de poca sangre también por lo que no rinde suficiente para toda la muestra
- Ocurre cuando hay poca distribución de la sangre a lo anchoo del portaobjetos extensor
- Zonas sin sangre: Ocurre debido al mal lavado del porta, dejando restos de grasa o suciedad sobre la superficie de estos
- Presión desigual del porta extensor: Si se hace una presión mayor sobre un lado que del otro dará resultados como el de la imagen
- Demora de la extensión
Bibliografía
-Benjamin Garcia Espinosa, Faustin R. C., Manuel C. C. (1997) Hematología I: Citología, Fisiología y Patología de Hematíes y Leucocitos. Thomson Paraninfo. 3a Edición. Madrid, España
-Wright, Grünwald, & May. (s/f). Extendido de Sangre Periférica. Slideplayer.es. Recuperado el 30 de mayo de 2023, de https://slideplayer.es/slide/12983626/