Frotis Sanguíneo (Tinción de Wright)

 

Introducción

La tinción de Wright es una tinción empleada en el extendido sanguíneo con la finalidad de ver e identificar las diferentes células sanguíneas pues muchas de ella son incoloras al microscopio impidiendo su distinción e identificación

El macrófago es el derivado del monocito cuando
ha llegado a un organo

Es una tinción tipo Romanowsky

Metodo con 2 principios de tinción

• Fijación de sangre
• Tinción de colorantes (como el azul de metileno)

Fundamento

Se usa una solución que mezcla eosina con azul de metileno (50-75%) y azur (10-25%) ademas de derivados de alcohol metílico 

Azur es el nombre que se le da a las metilteoninas los cuales son derivados  de la oxidación del azul de metileno

Gracias al metanol del colorante ya no es necesario hacer fijación (pues este cumple esa función) a menos que la muestra se guarde sin haberse teñido

El colorante dará una coloración morada en DNA y un azulado en RNA

Material

• Microscopio
• Puente de tinción
• Agua destilada
• Pipeta Pasteur
• Tubos de ensayo
• Reactivos

Reactivos

• Solución de eosina-azul de metileno
• Solución Buffer de fosfato

Muestra

Sangre venosa anticoagulada con EDTA o Heparina (preferente EDTA)

Procedimiento

1. Colocamos nuestro frotis sobre el puente de tinción
2. Agregamos y cubrimos con la solución de eosina-azul de metileno (colorante de wright)
3. Dejar actuar por 6-7 minutos
4. Agregar Solución de Buffer en zig-zag para que se combine, la solucion de pondra tornazol
5. Dejar por 10 minutos
6. Limpiar con agua destilada y secar
7. Una vez hecho observar al microscopio a inmersión

Lectura de resultados

• Los eritrocitos tomaran un color rosa 
  
• Las plaquetas de color violeta
• Neutrófilos núcleo azul violeta y su citoplasma rosa, las granulaciones será de color rojo violeta
  
• Eosinófilos núcleo azul violeta pero su citoplasma azul y gránulos rojo anaranjado
• Basófilos núcleo purpura con granulaciones  azul oscuro
• Monocitos y linfocitos  tendrán color violeta su núcleo azul el citoplasma (esto ultimo es de un color mas claro en el monocito)

Las células de atrás de gran abundancia son los eritrocitos
y los puntos morados sueltos son las plaquetas