Frotis Sanguíneo (Tinción de Wright)

 

Introducción

La tinción de Wright es una tinción empleada en el extendido sanguíneo con la finalidad de ver e identificar las diferentes células sanguíneas pues muchas de ella son incoloras al microscopio impidiendo su distinción e identificación

El macrófago es el derivado del monocito cuando
ha llegado a un organo

Es una tinción tipo Romanowsky


Metodo con 2 principios de tinción

  • Fijación de sangre
  • Tinción de colorantes (como el azul de metileno)


Fundamento

Se usa una solución que mezcla eosina con azul de metileno (50-75%) y azur (10-25%) ademas de derivados de alcohol metílico 

Azur es el nombre que se le da a las metilteoninas los cuales son derivados  de la oxidación del azul de metileno

Gracias al metanol del colorante ya no es necesario hacer fijación (pues este cumple esa función) a menos que la muestra se guarde sin haberse teñido

El colorante dará una coloración morada en DNA y un azulado en RNA


Material

  • Microscopio
  • Puente de tinción
  • Agua destilada
  • Pipeta Pasteur
  • Tubos de ensayo
  • Reactivos

Reactivos
  • Solución de eosina-azul de metileno
  • Solución Buffer de fosfato
Muestra
Sangre venosa anticoagulada con EDTA o Heparina (preferente EDTA)

Procedimiento
  1. Colocamos nuestro frotis sobre el puente de tinción
  2. Agregamos y cubrimos con la solución de eosina-azul de metileno (colorante de wright)
  3. Dejar actuar por 6-7 minutos
  4. Agregar Solución de Buffer en zig-zag para que se combine, la solucion de pondra tornazol
  5. Dejar por 10 minutos
  6. Limpiar con agua destilada y secar
  7. Una vez hecho observar al microscopio a inmersión

Lectura de resultados
  • Los eritrocitos tomaran un color rosa 
  • Las plaquetas de color violeta
  • Neutrófilos núcleo azul violeta y su citoplasma rosa, las granulaciones será de color rojo violeta
  • Eosinófilos núcleo azul violeta pero su citoplasma azul y gránulos rojo anaranjado
  • Basófilos núcleo purpura con granulaciones  azul oscuro
  • Monocitos y linfocitos  tendrán color violeta su núcleo azul el citoplasma (esto ultimo es de un color mas claro en el monocito)
Las células de atrás de gran abundancia son los eritrocitos
y los puntos morados sueltos son las plaquetas