Introducción
La bilirrubina es el resultado de la degradación de la hemoglobina dentro de los glóbulos rojos, cuando estos entran en hemolisis. es sintetizada por el sistema reticuloendotelial que se encuentra en el bazo, hígado y médula ósea; y es eliminada por el hígado que la envía hacia la bilis en donde se almacena y esta se vacía la mayoría en el duodeno, pasando a los intestinos y siendo excretada en las heces fecales (este proceso es parte del llamado metabolismo de los eritrocitos.
Gracias a ella es que la orina y las heces se les da su característico color pues es el que pigmenta la bilis.
Metabolismo de los eritrocitos
1.- Todo empieza por los glóbulos rojos que recorren el torrente sanguíneo durante 120 días
2.- Luego de ese tiempo estos glóbulos rojos viejitos son enviados al bazo para su destrucción, aquí el sistema retículo-endotelial (sistema mononuclear fagocítico) descompondrá en hemo y en globina gracias a los fagocitos.
3.- La globina al ser una proteína se descompondrá en aminoácidos
4.- Por otro lado el grupo hemo, gracias a la hemoxidasa, esta se convierte en Monóxido de Carbono (CO), Biliverdina y Hierro
5.- El hierro volverá al sistema circulatorio y ahí se unirá a la transferrina, una proteína que transportara este hierro a la medula ósea roja o al hígado
6.- Si llega a la médula ósea, formará parte de la eritropoyesis, es decir servirá para la formación de nuevos glóbulos rojos
7.- Pero si llega al hígado (mas específicamente al hepatocito), este llegara en forma de ion férrico, ahí se unirá a la ferritina para que sea almacenado
8.- Mientras tanto la biliverdina se convertirá en la bilirrubina no conjugada, la cual es hidrofóbica, es decir no se puede disolver en agua por lo que para ser transportada requiere de unirse a la albúmina para ser llevada al hígado.
9.-Con ayuda de la enzima UDP-Glucoronil Transferasa, la Bilirrubina se combinara con el ácido glucorónico podrá convertirse en Bilirrubina Conjugada (esta si es soluble en agua) y se enviará al duodeno
10.- Para terminar esta bilirrubina conjugada por acción de las B-glucoronidasas bacteriana se convertirá en urobilinógeno y terminará yendo a diferentes partes del cuerpo
11.- Entre e18-19% del urobilinógeno volverá a absorberse y se quedará en la circulación enterohepática; el 80% se oxidará y se convertirá en estercobilina que es la que dará su color a las heces y el otro 1-2% también se oxidará pero este terminará en el riñón convirtiéndose en urobilina (el pigmento de la orina)
Importancia clínica
En la sangre es posible hallar pequeñas cantidades de bilirrubina, sin embargo esta se eleva cuando hay una excesiva destrucción de eritrocitos o porque el hígado no esta excretando correctamente la bilirrubina que se produce y por ende esta, este retenida.
Cuando hay hiperbilirrubinemia el cuerpo empieza presentar síntomas tales como la ictericia, que es la coloración de la piel y la mucosa. La ictericia generalmente marca la existencia de enfermedades hepáticas o por el bloqueo de las vías biliares
Aunque hay veces que se producen enfermedades relacionadas al metabolismo de la bilirrubina y no afectan el resto de las funciones del hígado, tal es el caso de la enfermedad de Gilbert, aunque son pocos los casos
Patologías
-Ictericia Hepatocelular (Causada por Enfermedad hepática)
- Hepatitis Celular
- Cirrosis
- Mononucleosis Infecciosa
- Tumor de hígado
- Colangitis
- Colelitiasis
- Tumor de vías hepáticas
- Tumor de cabeza de páncreas
- Adherencias
- Anemia perniciosa
- Incompatibilidad de Rh
- Incompatibilidad de grupo ABO
-Elevación de bilirrubina no conjugada por
- Anemia hemolítica
- Traumatismo por gran hematoma
- Infarto pulmonar
- Enfermedad de Gilbert
-Elevación de bilirrubina conjugada por
- Cancer de páncreas
- Coledocolitiasis
- Síndrome de Dubin-Jhonson
Fundamento
Por lo general, para la cuantificación de bilirrubina se hace uso del método Malloy-Evelyn, la cual consiste en un método colorimétrico, en el que la bilirrubina reacciona con el ácido sulfanílico diazotado lo que da lugar a la azobilirrubina, la cual es posible medir al fotómetro.
La bilirrubina conjugada será la que reaccione con el reactivo, siempre y cuando se realice en un medio acuoso, es por esta característica que la bilirrubina conjugada se le llama directa, pues el suero, al tener contacto con el reactivo (ácido sulfanilico + ácido clorhídrico) , da una coloración, a diferencia de la no conjugada (indirecta) al ser hidrofóbica se requiere de una sustancia extra para su solubilidad: el Dimetilsulfoxido (DMSO), esta contribuirá a la reacción de disociación y asi obtener una coloración
Como se sabe la bilirrubina total es la combinación de la bilirrubina directa con la indirecta es por ello que para su coloración y cuantificación se requiere de los 3 reactivos (Ácido sulfanílico, Ácido Clorhídrico, DMSO)
Metodo: Malloy-Evelyn
Tecnica Colorimétrico
Muestra: Suero o plasma libre de hemolisis
Material
- Micropipetas
- Centrifugadora
- Fotómetro
- Tubos de ensaye
- Reactivos
Reactivos
| REACTIVO 1 Bilirrubina Directa | -Acido sulfanílico -Acido Clorhídrico | 30 mmol/L 150 mmol/L |
| REACTIVO 2 Bilirrubina Total | -Acido sulfanílico -Acido Clorhídrico -DMSO | 30 mmol/L 50 mmol/L 7 mmol/L |
| REACTIVO 3 | Nitrito de Sodio | 29 mmol/L |
Condiciones
Longitud de onda: 550 (530-580) nm
Temperatura: 15-25/37°C
Procedimiento
1.- Centrifugar la muestra
2.- Ajustar a cero frente a agua destilada
3.- Pipetear
| Blanco del total | Total | Blanco del directo | Total | |
| R1 Bilirrubina Directa (mL) | ----- | ----- | 1.0 | 1.0 |
| R2 Bilirrubina Total (mL) | 1.0 | 1.0 | ----- | ----- |
| R3 Nitrito de Sodio (µL) | ----- | 50 | ----- | 50 |
| Muestra/Calibrador (µL) | 100 | 100 | 100 | 100 |
4.- Mezclar e incubar la muestra durante 5 minutos a temperatura 15-25°C
5.- Leer las densidades ópticas de todos los datos
6.- Realizar los respectivos cálculos
Cálculos
Valores de referencia
Bilirrubina total
Adultos: Hasta 1.10 mg/dL = 18.81 µmol/L
Recién nacidos: <12 mg/dL = <205.2 µmol/L
Bilirrubina indirecta
Adultos: <1.0 mg/dL
Bilirrubina directa
Adultos: Hasta 0.25 mg/dL = 4.27 µmol/L
Recién nacidos: Hasta 0.6 mg/dL
Interferencias:
La presencia de hemolisis disminuye el valor de Bilirrubina.
Las drogas y ciertas sustancias interfieren con la determinación.
Bibliografía
-Dr. Six (2017, abril 10). METABOLISMO DE LA HEMOGLOBINA Y BILIRRUBINA. YouTube.com. Recuperado de: https://youtu.be/rngxogc0CPo
-Guyton & Hall: Compendio De Fisiología Médica. 13ª ed. Barcelona. Elsevier, 2016.
-Colorimétrico, D. (s/f). Bilirrubina T & D. Com.mx. Recuperado el 29 de mayo de 2023, de https://www.spinreact.com.mx/public/instructivo/QUIMICA%20CLINICA/LIQUIDOS/1001044%20BILI%20T&D.pdf