Instroducción
Es la cuinatificación de globulos rojos existentes en 1 mm3 a partir de un conteo en la camara de Neubauer
Fundamento
La sangre se diluye en diluyente Hayem para posteriormente ser colocado en una cámara de Neubauer, ahi se contarán las células presentes en los 5 cuadrantes medianos del centro
Muestra
Sangre anticoagulada con EDTA
Material
- Pipeta de Thoma
- Tubo de goma con boquilla
- Cámara de recuento Neubauer
- Cubreobjetos especial
- Microscopio
- Caja petri
Reactivo
Liquido de Hayem | Sulfato Sódico Cloruro Sódico Cloruro Mercúrico Agua destilada | 2.5 g 0.5 g 0.25 g 100 ml |
Tambien se puede utilizar solución isotónica
Procedimiento
Procedimiento
- Posicionar el cubreobjetos en la cámara de Neubauer
- Colocar el tubo de goma en la entrada superior de la pipeta de Thoma
- Aspirar de un tubo sangre llenando la pipeta hasta 0.5 (si sobrepasa esta graduación tomar un pedazo de papel o algodón y colocando en la puta para que absorba el sobrado
- Limpiar la pipeta por fuera con un papel
- Aspirar diluyente hasta llegar a la graduación 101
- Quitar el tubo de goma y tapar los extremos con papel parafilm
- Poner en el agitador por 60 segundos
- Una vez hecho retirar el papel y desechar las primeras 3 o 4 gotas emitidas por la pipeta
- Depositar la siguiente gota entre el cubreobjetos y la cámara dejando que esta se absorba y distribuya por capilaridad.
La pipeta debe estar colocada en posición casi vertical - Colocar la cámara de Neubauer en el microscopio
- Contar los eritrocitos de los 4 cuadrantes de las esquinas y el cuadrante de en medio
Recuerda que los cuadrados medianos (iluminados de rojo) son los que usaremos para contar eritrocitos. Cada cuadro rojo tiene dentro 16 cuadrados pequeños |
Es importante que para evitar confusiones, por ello, se hace el conteo solo dentro de la zona del cuadrado y en cuanto a los hematíes que se encuentran en las líneas solo se consideran los que están el borde superior y derecho
Los cuadrados pequeños se deben observar en zic zac
Cálculos
Una vez contados los 5 cuadrados medianos de la cámaras se debe realizar el siguiente calculo:G.R. = Glóbulos Rojos F. de Dilución = Factor de Dilución GR/mm3 = Globulos Rojos sobre milimetro3 |
- Sumamos los glóbulos rojos de los 5 cuadros medianos
- El resultado de la suma se multiplica por el factor de dilución (puede ser 100 o 200) y también por la inversa de la altura
- Por último se divide entre el área de cada 1 de los cuadros medianos (0.2 mm)
- El objetivo de tenerlo a la inversa a la altura es que indirectamente se multiplique con el área (Geometría: altura x área = mm3)
Valores de Referencia
Hombres: 4,400,000 - 6,000,000 G.R./mm3
Mujeres: 4,000,000 - 5,200,000 G.R./mm3
Interferencias
- Número alto de leucocitos
- Hemodilución
- Deshidratación
- Embarazo
- Resistencia a una gran altitud
- Hemorragia
- Medicamentos